紫外分光光度計的工作原理
許多有機化合物在紫外區具有特征的吸收光譜,因此可用紫外分光光度法對有機物質進行定性鑒定,結構分析及定量測定.紫外分光光度法定量測定的依據是比耳定律。首先確定化合物的紫外吸收光譜,確定zui大吸收波長。在選定的波長下,作出化合物溶液的工作曲線,根據在相同條件下測得待測液的吸光度值來確定待測液中化合物的含量。
紫外分光光度計使用范圍
凡具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物,根據在特定吸收波長處所測得的吸收度,可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。
儀器
可見-紫外分光光度計。其應用波長范圍為200~400nm的紫外光區、400~850nm的可見光區。主要由輻射源(光源)、色散系統、檢測系統、吸收池、數據處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。
儀器的校正
1.波長的準確度試驗 以儀器顯示的波長數值與單色光的實際波長值之間誤差表示,應在±1.0nm范圍內。可用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正。
2.吸收度的準確度試驗
3.雜散光的試驗
4.波長重現性試驗
5.分辨率試驗